Caldo Pplo Sem Cv - Pplo Broth Base Without Crystal Violet - 500G

PPLO Caldo Base sem Cristal Violeta

 

Uso Pretendido

 

PPLO Caldo Base sem Cristal Violeta é usado com enriquecimento para o isolamento e cultivo de

Mycoplasma spp. em um ambiente de laboratório. Caldo PPLO sem Violeta de Cristal não se destina ao uso em

o diagnóstico de doenças ou outras condições em humanos.

 

Descrição

 

PPLO Caldo Base sem Cristal Violeta é preparado de acordo com a fórmula descrita por Morton e

Lecce. A Violeta de Cristal pode inibir o crescimento de Mycoplasma e, portanto, foi removida de um

fórmula descrita por Morton, Smith, Williams e Eikenberg. Mycoplasma foi descoberto em um caso de

pleuropneumonia em uma vaca e referida como “organismo semelhante à pleuropneumonia” ou PPLO. Micoplasmas

pertencem à classe dos Mollicutes “pele macia”, que são os menores organismos de vida livre. Eles são

pleomórfico, variando em tamanho de 0,2 a 0,3 µm.

 

Formulação Típica

 

Infusão de coração                                     6,0 g / L

Peptona Enriquecida com Levedura        10,0 g / L

Cloreto de sódio                                         5,0 g / L

PH final: 7,8 ± 0,2 a 25 ° C

A fórmula pode ser ajustada e / ou complementada conforme necessário para atender às especificações de desempenho

 

Suplemento

 

Suplemento de soro estéril, 300 mL

 

Precaução

 

Consulte o SDS

 

Preparação

1. Dissolva 21 g do meio em 700 mL de água purificada.

2. Misture bem.

3. Autoclave a 121 ° C por 15 minutos.

4. Resfrie a 45 - 50 ° C e adicione assepticamente 300 mL do suplemento de soro estéril apropriado.

5. Misture bem.

Procedimento de Teste

1. Inocular os organismos em PPLO Broth Base W / O Crystal Violet, seguindo o tempo necessário e

temperatura.

2. Subcultura em Agar PPLO.

3. Consulte as referências apropriadas para obter detalhes completos sobre os procedimentos específicos para o isolamento e

identificação de Mycoplasma spp.

Especificações de controle de qualidade

Aparência desidratada: o pó é homogêneo, de fluxo livre e bege claro.

Aparência preparada: o meio preparado é de traço a claro turvo sem nenhum traço de precipitado e amarelo

 

Procedimento de Teste

 

1. Inocular os organismos em PPLO Broth Base W / O Crystal Violet, seguindo o tempo necessário e

temperatura.

2. Subcultura em Agar PPLO.

3. Consulte as referências apropriadas para obter detalhes completos sobre os procedimentos específicos para o isolamento e

identificação de Mycoplasma spp.

 

Especificações de controle de qualidade

 

Aparência desidratada: o pó é homogêneo, de fluxo livre e bege claro.

Aparência preparada: o meio preparado é de traço a claro turvo sem nenhum traço de precipitado e amarelo

 

Resposta de cultivo esperada:

 

As culturas foram inoculadas em caldo PPLO W / O CV e incubadas a 35 ±

2 ° C aerobicamente. Após 3, 4 e 5 dias de incubação, os organismos de teste foram subcultivados em PPLO

Agar. Placas de Agar PPLO foram incubadas a 35 ± 2 ° C sob enriquecimento de CO2 por 3-8 dias e examinadas

para a presença de colônias de Mycoplasma.

 

Resultados

 

Examine o Agar PPLO após 4 a 7 dias de incubação. As colônias de Mycoplasma são redondas, 0,01 a 0,5 mm em

diâmetro com um centro denso e uma periferia menos densa produzindo uma aparência de “ovo frito”.

 

Vencimento

 

Consulte a data de validade estampada no recipiente. O meio desidratado deve ser descartado se não

fluxo livre ou se a aparência da cor original mudou. A expiração se aplica ao meio em seu

recipiente intacto quando armazenado conforme as instruções.

Limitação do procedimento

Devido à variação nutricional, algumas cepas podem ser encontradas que crescem fracamente ou deixam de crescer neste

médio.

 

Armazenar

 

Armazene o frasco lacrado contendo o meio desidratado a 2 - 30 ° C. Depois de aberto e recapeado, coloque

recipiente em um ambiente de baixa umidade na mesma temperatura de armazenamento. Proteger contra umidade e luz

mantendo o recipiente bem fechado